シルクスポンジ その５

　半乾きのシルクスポンジ（表）


　半乾きのシルクスポンジ（裏）


　半乾きの角形シルクスポンジ（表）


　半乾きの角形シルクスポンジ（裏）

シルクスポンジ その４

　角形シルクスポンジ（凍結状態）



　解凍後、容器から出した角形シルクスポンジ

シルクスポンジ その３

解凍前のシルクスポンジ　（凍結状態）


解凍したシルクスポンジ


解凍したシルクスポンジを容器からだしたところ


水に浮かしたシルクスポンジ（真上から撮影）

シルクスポンジ その２

　絹フィブロイン水溶液と酵素水溶液を混合後、凍結処理を行うと酵素を固定化したシルクスポンジを作ることができます。
　シルクフィルムの場合と異なり、不溶化のためのアルコール処理がないため、酵素活性の低下が少ないと推定されます。

シルクスポンジ その１

　絹フィブロイン水溶液には、物理的力が加わると固まる性質があります。
　この性質を利用して、絹フィブロイン水溶液を凍結すると、凍結の際に物理的力が加わりスポンジ状に固まります。この固まりがシルクスポンジです。
　具体的なシルクスポンジの作り方は、いずれ時期をみて説明します。

家蚕繊維の断面

３００倍で観察。
細かい点ひとつひとつが繊維１本の断面です。


５００倍で観察。絹の特徴の三角断面がわかります。
家蚕のほうが天蚕より繊維が細いこともわかります。


８００倍で観察
三角断面をさらに拡大しました。　

天蚕繊維の断面

　デジタルマイクロスコープ（ＶＨＸ－１００　キーエンス）で観察・撮影。
　倍率は３００倍。
　銅板の小さな穴に繊維を詰め、両端をカットして繊維断面を観察。
　中心部分が天蚕繊維で、周辺は銅板の表面が見えています。

絹で酵素を固定化する その３

　ｐ－ニトロフェニル・りん酸二ナトリウム（ＰＮＰＰ）の水溶液（ｐＨ６～９）にアルカリホスファターゼを固定化した絹フィルムを入れます。ＰＮＰＰは絹フィルム中に浸透し、フィルム中のアルカリホスファターゼの作用でｐ－ニトロフェノール（ＰＮＰ）とリン酸に分解します。生成したＰＮＰとリン酸はフィルム中から水溶液中へ拡散していきます。ＰＮＰの水溶液が黄色であるため、液の色が透明から黄色に変化します。
　この液の特定波長（４１０ｎｍ）での吸光度を測ることで、ＰＮＰの濃度を求めることも可能です。

絹で酵素を固定化する その２

　酵素の固定化方法は三つに大別されます。

（１）担体結合法：水不溶性の担体に酵素を結合させる方法

（２）架橋法：酵素を２個またはそれ以上の官能基をもった試薬で架橋する方法

（３）包括法：酵素を高分子ゲルの微細な格子の中に包み込むか、半透膜性の高分子の皮膜によって被覆する方法
　
　「酵素工学」　福井三郎、千畑一郎、鈴木周一　編集　　東京化学同人（１９８１）より

絹による酵素固定は包括法になります。　　　　　　　　　　　

絹で酵素を固定化する その１

　絹フィブロイン水溶液と酵素を溶解した水溶液を混合し、シルクフィルムを作る要領で水平なプラスチック板上に混合液を展開し、自然乾燥しフィルムを作製します。このフィルムを５０％エチルアルコール中に３０分間浸漬して不溶化処理を行い、水洗後乾燥します。これにより、酵素を包括固定した絹フィブロインフィルムが作製できます。

　不溶化処理の際、アルコールの作用で酵素の活性が幾分失われることがあるので、その点を改良した別の固定化方法もあります。